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pCr扩增目的基因实验结果

PCR扩增技术已广泛地用于分离目的基因.如果知道目的基因的全序列或其两侧的序列,可以通过合成一对与模板DNA互补的引物,十分有效地扩增出含目的基因的DNA片段,采用常规PCR技术扩增分离目的基因比较方便,但必须知道待扩增

根据目的基因设计引物,然后进行PCR,如果有扩增产物,不就表明含有目的基因,如果没有的话,就表明没有成功转入目的基因.

1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA 2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链. 3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′ 端延伸,合成与模板互补的DNA链. 每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍.

大量扩增目标基因片段,用于基因工程或检测.如:怀疑牛肉中掺杂马肉,就可以用马基因的特异性引物对样品进行PCR,经扩增后如果能够得到响应条带,就可证实.方法简单易行,相比其它方法有优越性.

应该是一段目的基因.PCR就是在体外进行DNA的扩增.

定量PCR 【定义】 定量PCR是PCR的一种.PCR仪目的为了基因扩增.在基因扩增中最重要的就是升降温过程,最早的PCR就是三个水浴锅,一个机械臂,定时抓出反应槽转换水浴锅.PCR的结果需要借助其他手段来检测.后来随着定量技术的发展,将PCR和检测做成一体,就形成了定量PCR仪.还可以与荧光技术结合,同时在每个扩增过程都能实施监控.【应用】 :定量PCR可以得出准确的定量结果,改变了PCR只用作微量物定性测定的历史,并可进行动态检测和病程疗效分析.同时让质控的建立成为可能,以保证结果的准确性.能对基因突变进行分析.

(1)目的基因DNA受热变性成为单链→引物与单链结合成互补序列→在DNA聚合酶作用下延伸)→重复循环完成扩增 [其他合理答案亦可] (2)①高压蒸汽灭菌;在酒精灯附近倒平板) ②对照 &nbs

pcr的目的基因是所做该病的特异性基因,特异性基因来源于学术性文章也就是其他人对该病的研究,知道是哪一个片段后;去genebank找到大段基因,然后做特异性比对就可以得到目的基因咯.

你是说PCR产物电泳出现多带或产物没序后有多种序列?总之,有可能是引物退火温度太低,错配的结果.建议提高退火温度或换引物.

(1)PCR扩增开始前,需要向离心管中加入的物质除了DNA样品,Taq酶以及缓冲液之外,还需要加入四种脱氧核苷酸 和引物.(2)A过程为高温变性,B过程为退火,C过

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